由于上尿路尿路上皮癌术后容易复发，目前术后随访普遍采用高侵入性检查或低敏感性检查。岩手医科大学泌尿科学讲座的研究生田村大地和小原航教授、医齿药综合研究所医疗开发研究部门的西塚哲特任教授等人的研究团队，与东京大学研究生院新领域创成科学研究科的铃木穰教授等共同发表研究成果称，通过追踪检查血液和尿液中存在的患者特异性癌症衍生DNA，可以检测出上尿路尿路上皮癌的术后复发情况。相关成果已刊登在《Cancer Science》上。
图1．ctDNA监测结果
ctDNA监测结果显示，所有膀胱复发病例尿液中ctDNA均呈阳性，所有转移复发病例血液中ctDNA均呈阳性。此外，转移病例的其中1例同时出现膀胱复发和转移复发。另一方面，所有非复发病例中ctDNA维持阴性（供图：岩手医科大学）
研究团队从23例接受上尿路尿路上皮癌手术患者的手术标本的肿瘤组织中提取了DNA，并使用下一代测序技术（NGS）进行了全外显子组测序和TERT（端粒酶逆转录酶）启动子突变分析。
首先，采集手术前后的血浆和尿液上清液，并提取DNA。根据肿瘤基因突变分析结果，选择每个病例追踪的病例特异性基因突变，并在术后2年内使用数字PCR（dPCR，核酸分子绝对定量技术）监测变异等位基因频率（VAF）。
用于dPCR分析的引物/探针套装（primer/probe set）主要选自岩手医科大学开发的资料库。研究人员将其与现有的检测方法（CT、膀胱镜检查、尿细胞学检查）进行比较，验证了其作为术后监测生物标志物的妥当性，以及ctDNA（循环肿瘤基因）的VAF及其变化是否与术后复发相关。
在每个病例中选择了追踪的病例特异性基因突变后，发现83%的病例具有OTS1000ex中包含的突变。对于其余病例，通过合成新探针，使所有病例均可进行ctDNA监测。当使用手术前收集的血浆和尿液进行dPCR时，96%的病例检测到了病例特异性突变。
在术后复发病例中，所有膀胱复发病例的尿液中ctDNA在复发时均呈阳性，并且相比尿细胞学检查，可以以更高的灵敏度检测复发。所有转移复发病例的血液中ctDNA均呈阳性。特别是在膀胱复发病例中，尿液中ctDNA呈阳性的时间比现有检测方法早约2个月。在所有术后未复发的病例中，从现有随访开始的术后3个月后ctDNA仍为阴性。
对术后复发和未复发病例的手术前后的VAF下降率进行比较后发现，复发病例术前和术后第2天尿液中VAF下降率明显较低。对风险因子的分析结果显示，尿液中ctDNA术后第2天VAF下降率与低组别的无复发生存期相比较明显较短。
因此，ctDNA检测有可能预测术后复发的风险，且有助于术后辅助疗法的治疗适应。岩手医科大学针对癌症，目前已在自费诊疗中实施利用血液的ctDNA监测。
原文：《科学新闻》
翻译：JST客观日本编辑部
【论文信息】
杂志：Cancer Science
论文：Postoperative recurrence detection using individualized circulating tumor DNA in upper tract urothelial carcinoma
DOI：doi.org/10.1111/cas.16025
